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转基因检测试剂盒

规格型号:Bt Cry2A

Bt Cry2A转基因试剂盒用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗,双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性来检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。

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产品详情

    一、产品介绍

    Bt Cry2A转基因检测试剂盒用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗,双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性来检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。

     

    二、产品编号

    规格:96孔

    检测样本:种子/叶片

    检测时间:约2小时

    有效期:12个月

    储存条件:2℃~8℃避光保存,切勿冷冻

     

    三、检测原理

    转基因检测试剂盒用特异性抗 Cry2A 单抗包被的微孔板和酶标记抗 Cry2A 单抗,双抗体夹心法检测 Cry2A 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的 Bt-Cry2A 蛋白。

     

    四、试剂盒组份(规格)

    预包被板(抗 Cry2A 单抗)      12 孔×8

    Cry2A 酶标抗体                        12 ml×1 瓶

    20×浓缩洗涤液                         30 ml×1 瓶

    5×抽提液/稀释缓冲液               30 ml×1 瓶

    底物液 A                                   7 ml×1 瓶

    底物液 B                                   7 ml×1 瓶

    终止液                                      7 ml×1 瓶

    使用说明书                               1 份

    0ppb 阴性对照                         1ml

    3 个不同浓度的标样:

    1 ppb, 5 ppb,10 ppb          各 1ml

     

    五、试剂准备

    试剂盒中的 20×浓缩洗涤液 30 ml 加 570 ml 灭菌 ddH2O 溶解稀释至 1×洗涤液,5×抽提液(30 ml)加 120 ml ddH2O 稀释至 1×抽提液,4 ℃存放备用。

     

    六、样品准备

    称取约 20 mg 叶片,加 0.5 ml 1×抽提液(使用前 30 min 放置室温)研磨至匀浆,室温放置 30 min,测定前把样品上清液稀释 5-20 倍。

    测定茎干和胚乳中的 Bt 蛋白时,样品称取约 40 mg,加 1ml 1×抽提液研磨。

     

    七、ELISA 反应

    1. 依次加 100 μl 阴性对照,标准品(3 个不同浓度的标样: 1 ppb, 5 ppb,10ppb)和待测样品至 96 孔板;

    2. 用封口膜盖住 96 孔板,快速摇动平板混匀样品;

    3. 37 ℃恒温箱孵育 30 min;

    4. 倒掉 96 孔板中液体,用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板,漂洗 5 次,用吸水纸拍干;

    5. 按顺序在每个小孔中加入 100 μl Cry2A-酶标抗体,然后重复步骤 2;

    6. 37 ℃恒温箱孵育 30 min;

    7. 倒掉 96 孔板中液体,用 1×洗涤液每孔 250 μl 洗涤微孔板,漂洗 5 次,用吸水纸拍干;

    8. 依次加入 50 μl 底物 A 液,50 μl 底物 B 液,重复步骤 2;

    9. 37℃恒温箱孵育 10 min,加 50μl 终止液,充分混匀终止反应,15 min 以内在酶标仪上读取结果。在 450 nm 为主波长,630 nm 为次波长(或单波长 450 nm)下,用空白孔校零,再读取各孔 OD 值。

     

    八、操作注意事项

    1. 测定中需使用的所有试剂和 96 孔板提前 30 min 放置室温温育(否则会影响试验准确性),注意 12 连管必须温育后再从平板上取下,未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存;

    2. 试剂使用前应充分摇匀;

    3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染;

    4. 使用洗涤液漂洗时,洗涤液需要填满每个小孔,进行充分漂洗;

    5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量,可以暂时在 4 ℃避光保存,但是最好在 24 h 内测定;

    6. 结果判读请在反应终止后 15 min 内完成。

     

    九、Bt 蛋白浓度计算公式

    Bt 蛋白浓度(μg/g)=

     

    十、转基因试剂盒储存条件及有效期

    试剂盒储存于 2-8℃,切勿冻存;未开封试剂盒有效期 12 个月,开封后 3 个月内用完。(见包装盒上标签有效期)

     

    十一、转基因试剂盒技术参数

    本品适用于玉米、棉花、大豆以及其各种农作物中转基因成分的快速定性测试。



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